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上海市資源植物(wù)功能基因組學實驗室
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上海辰山植物(wù)科學研究中心
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近日,藥用(yòng)植物(wù)與健康組成功完成了(le)唇形科植物(wù)黃(huáng)芩全基因組測序,并分(fēn)析了(le)黃(huáng)芩中活性成分(fēn)的(de)進化(huà)機制,進而完整闡明(míng)了(le)抗癌活性物(wù)質漢黃(huáng)芩素的(de)合成機制。這(zhè)一研究成功解析了(le)一種使用(yòng)2000多(duō)年的(de)藥用(yòng)植物(wù)中的(de)珍貴化(huà)學物(wù)質合成途徑,爲通(tōng)過合成生物(wù)學獲取漢黃(huáng)芩素提供了(le)基礎,也(yě)爲其它唇形科植物(wù)的(de)遺傳分(fēn)析提供了(le)參考。該工作于近日在線發表在Molecular Plant上。

黃(huáng)芩是一種著名的(de)中藥植物(wù),原産于中國,因其具有良好的(de)治療特性而在世界範圍内廣泛種植。黃(huáng)芩葉片中含有野黃(huáng)芩素、野黃(huáng)芩苷,根中則含有黃(huáng)芩素、漢黃(huáng)芩素等活性物(wù)質。這(zhè)些黃(huáng)酮類物(wù)質具有抗菌,抗病毒,抗氧化(huà),抗癌,保肝和(hé)神經保護特性。盡管黃(huáng)芩具有很好的(de)經濟效益,需求在不斷增加,但由于缺乏基因組信息而使黃(huáng)芩栽培育種及遺傳改良受到限制。

通(tōng)過全基因組測序,研究團隊首先對(duì)PacBio數據進行組裝,然後結合Illumina數據糾錯,通(tōng)過10 X genomics數據延伸片段長(cháng)度,組裝出386.63 Mb、占預估基因組94.73%的(de)黃(huáng)岑基因組,最後通(tōng)過Hi-C數據将98.04%基因組序列挂載至9條染色體,N50 達到 33.2 Mb。研究者進一步從花、花蕾、葉、莖、根及JA處理(lǐ)的(de)根中提取樣品進行RNA-Seq,輔助基因組注釋,共注釋了(le)28,930個(gè)基因。黃(huáng)岑基因組重複序列達55.15%,串聯重複和(hé)散布重複分(fēn)别占1.2%和(hé)53.95%,其中,LTR最爲豐富,占基因組的(de)34.4%。

唇形科植物(wù)中,隻有黃(huáng)芩屬物(wù)種含有4’-去氧黃(huáng)酮類物(wù)質(如黃(huáng)芩素、漢黃(huáng)芩素),爲了(le)搞清楚該類化(huà)合物(wù)進化(huà)機制,研究者比較了(le)黃(huáng)芩、芝麻、丹參及一串紅的(de)基因組。分(fēn)析發現,黃(huáng)酮途徑合成酶基因僅在黃(huáng)芩中得(de)到了(le)擴增。其代謝途徑中最關鍵的(de)合成基因,均于黃(huáng)芩屬物(wù)種分(fēn)化(huà)後通(tōng)過串聯重複産生。

在前期研究工作中,該團隊已完整解析了(le)去甲漢黃(huáng)芩素合成途徑,而去甲漢黃(huáng)芩素還(hái)需經過氧甲基轉移酶(OMT)作用(yòng)來(lái)合成黃(huáng)芩素。研究者在一個(gè)黃(huáng)芩基因組中特有的(de)串聯重複區(qū)内找到數個(gè)OMT候選基因,通(tōng)過酶活及RNAi實驗,找到了(le)負責合成黃(huáng)芩素的(de)酶PFOMT5,該工作完整解析了(le)漢黃(huáng)芩素合成途徑。

文章(zhāng)通(tōng)訊作者,英國皇家科學院院士(Fellow of Royal Society,FRSCathie Martin教授說道,黃(huáng)芩的(de)參考基因組将有助于爲唇形科家族的(de)其他(tā)成員(yuán)基因組序列組裝和(hé)改進,并爲在藥用(yòng)植物(wù)中解析有價值化(huà)合物(wù)的(de)合成途徑提供重要基礎。

辰山中心藥用(yòng)植物(wù)與健康組執行責任人(rén)趙清博士爲論文第一作者,旋花植物(wù)進化(huà)組組長(cháng)楊俊博士爲共同第一作者。科研中心工作人(rén)員(yuán)崔孟穎、柳潔、方譽民、顔夢曉等參與了(le)主要的(de)實驗及分(fēn)析工作。本項的(de)合作者還(hái)包括辰山中心、上海植物(wù)生理(lǐ)生态研究所的(de)陳曉亞研究員(yuán),辰山中心胡永紅研究員(yuán),美(měi)國MIT的(de)翁經科研究員(yuán)等。項目得(de)到科技部國家重點研發計劃、上海綠化(huà)局辰山專項、國家自然科學基金委,中國科學院-英國約翰英納斯中心植物(wù)和(hé)微生物(wù)科學聯合研究中心,中科院青促會項目的(de)支持。

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1,黃(huáng)芩基因組組裝情況

全文鏈接:https://www.cell.com/molecular-plant/fulltext/S1674-2052(19)30131-5